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ubiquigent 66-0001-050說(shuō)明書

 更新時(shí)間:2021-03-01 點(diǎn)擊量:1167

ubiquigent 66-0001-050說(shuō)明書

 

  • Name
    Catalogue Number
    Size
    Price
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  • BRSK2 residues (2-674) [6His-tagged]
    66-0001-050
    50 µg
    £250

 

  • 物種
    人類
  • 來(lái)源
    Sf21昆蟲(chóng)細(xì)胞桿狀病毒表達(dá)
  • 數(shù)量
    50微克
  • 貯存
    -70°攝氏度
  • 專注
    1毫克/毫升
  • 公式
    50 mM Tris / HCl pH 7.5、0.1 mM EGTA,150 mM NaCl,270 mM蔗糖,0.03%Brij,0.1%b-巰基乙醇,1 mM芐am,0.2 mM PMSF
  • 分子量
    ?78.3 kDa
  • 穩(wěn)定
    在-70°C下存放12個(gè)月;根據(jù)需要等分
  • 蛋白質(zhì)序列
    登記號(hào):AAP97725.1。有關(guān)完整蛋白質(zhì)序列的信息,請(qǐng)下載分析證書pdf。
  • 質(zhì)量檢查;蛋白質(zhì)鑒定
    通過(guò)質(zhì)譜確認(rèn)。
  • 質(zhì)量檢查;活動(dòng)
    活性測(cè)定:  His-BRSK2的比活性使用Hastie等人所述方法測(cè)定(2006年)的酶在幾個(gè)濃度下進(jìn)行了測(cè)定。在存在CHKtide底物(300µM)和[γ- 32 P] ATP(100µM)的情況下,將His-BRSK2在激酶反應(yīng)緩沖液中于30°C孵育10分鐘。通過(guò)將測(cè)定混合物點(diǎn)到Whatman P81紙上來(lái)停止重復(fù)的反應(yīng)-捕獲磷酸化的底物。在閃爍計(jì)數(shù)器上測(cè)量摻入的放射性,并計(jì)算酶的平均比活度。 

    His-BRSK2比活度: 333.7單位/毫克(333.7單位/毫升)

    1分鐘內(nèi)將1單位= 1毫摩爾磷酸鹽摻入基質(zhì)中

    底物:CHKtide(KKKVSRSGLYRSPSMPENLNRPR)

蛋白質(zhì)泛素化和蛋白質(zhì)磷酸化是調(diào)節(jié)真核細(xì)胞中蛋白質(zhì)功能的兩個(gè)主要機(jī)制。然而,這些不同的翻譯后修飾并非彼此獨(dú)立地起作用,而是經(jīng)常相互連接以使得能夠以更復(fù)雜和復(fù)雜的方式控制生物過(guò)程。研究蛋白質(zhì)磷酸化事件如何控制泛素系統(tǒng)以及泛素化如何調(diào)控蛋白質(zhì)磷酸化已成為細(xì)胞調(diào)控和人類疾病研究的重點(diǎn)。Miura等人首先描述了人腦特異性激酶2(BRSK2)的克隆(1998)。BRSK2是蛋白激酶亞家族的成員,其包括AMP激活的蛋白激酶(AMPK),并且與AMPK本身一樣,被腫瘤抑制激酶LKB1激活(Lizcano,2004)。顧名思義,BRSK2在大腦中表達(dá),在控制神經(jīng)元細(xì)胞極化中起著至關(guān)重要的作用。BRSK2包含一個(gè)與激酶催化結(jié)構(gòu)域相鄰的泛素樣結(jié)構(gòu)域(Al-Hakim,2008)。

參考:

Al-Hakim AK,Zagorska A,Chapman L,Deak M,Peggie M,Alessi DR(2008)通過(guò)USP9X和非典型Lys(29)/ Lys(33)-連接的泛素鏈控制AMPK相關(guān)激酶。生物化學(xué)雜志 411,249-60。

Hastie CJ,McLauchlan HJ,Cohen P(2006)使用放射性標(biāo)記的ATP的蛋白激酶測(cè)定:一種方案。Nat Protoc 1,第968-71頁(yè)。

Miura K,Masuzaki H,Ishimaru T,Niikawa N,Jinno Y(1998)人類染色體11p15.5上一個(gè)新基因中的HhaI / BstUI多態(tài)性。?人類遺傳學(xué) 90,283-4。

Lizcano JM,Goransson O等人。(2004)LKB1是激活A(yù)MPK亞家族的13種激酶的主激酶,包括MARK / PAR-1。EMBO J 23,833-43。

背景:

菲利普·科恩爵士FRS,F(xiàn)RSE

鄧迪大學(xué)

醫(yī)學(xué)研究理事會(huì)蛋白質(zhì)磷酸化部門主任(1990-2012)

 

包含蛋白質(zhì)泛素化單元的蘇格蘭細(xì)胞信號(hào)研究所所長(zhǎng)(2008-2012)

 

信號(hào)傳導(dǎo)治療學(xué)系聯(lián)合主任(1998-2012)

 

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)治療部副主任(2012年7月起)

科恩教授的研究小組正在研究蛋白質(zhì)磷酸化和蛋白質(zhì)泛素化之間
在先天免疫調(diào)節(jié)中的相互作用。

 

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